三菱mr-j3伺服系統(tǒng)將伺服的速度和性能提升到一個(gè)新的臺(tái)階.功率從50w 到 7kw, 放大器和電機(jī)的體積進(jìn)一步減小, 增加了高分辨率編碼器, 自整定功能和共振控制. j3的高扭拒電機(jī)速度高達(dá)6000 rpm, 頻率響應(yīng) 900 hz. j3的262,144ppr 高分辨率編碼器為標(biāo)準(zhǔn)配置, 這樣低速時(shí)能提供更穩(wěn)定的控制. 三菱電機(jī)自動(dòng)化開(kāi)發(fā)的模型自適應(yīng)控制和自整定功能使得高精度的調(diào)節(jié)更容易, j3振動(dòng)控制可自動(dòng)抑制機(jī)械共振.mr-configurator設(shè)定軟件使得參數(shù)設(shè)定,診斷和調(diào)節(jié)非常簡(jiǎn)單. mr-configurator增強(qiáng)了許多診斷功能,如機(jī)械分析, 軟件示波器,高速監(jiān)視器. 參數(shù)設(shè)定窗口使得系統(tǒng)啟動(dòng)非常容易, usb接口使得高速采樣和長(zhǎng)時(shí)間波形測(cè)量成為可能.mr-j3 支持下列控制模式:位置控制,速度控制,扭矩控制, sscent網(wǎng)絡(luò), rs485多點(diǎn)通訊. 構(gòu)成完整的系統(tǒng)需選擇:
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mr-j3-a/b 標(biāo)準(zhǔn)放大器技術(shù)規(guī)格
說(shuō)明:1. 當(dāng)使用表中的電源電壓及頻率時(shí), 與相應(yīng)放大器組合使用的伺服電機(jī)的額定輸出和速度如表中所示. 當(dāng)電源電壓低于表中指定的電壓時(shí)扭矩將下降2. 扭矩特性請(qǐng)參閱伺服電機(jī)扭矩特性介紹3. 每個(gè)系統(tǒng)的制動(dòng)電阻都不同.請(qǐng)使用msize 軟件選擇合適的制動(dòng)電阻. 伺服放大器mr-j3-500a/b, mr-j3-700a/b ,mr-j3-na/b1需軟件版本a3以上.4. 安裝冷卻風(fēng)扇(1.0m3/min, 近 n92).5. 特殊規(guī)格沒(méi)有動(dòng)態(tài)制動(dòng)的型號(hào): mr-j3-na/b -ed, mr-j3-na1/b1-ed 可供選擇6. mr-j3-350a/b或更小的放大器近安裝. 但環(huán)境溫度需在0 - 45°c范圍內(nèi), 或使用75%或更小的負(fù)載.7. 300ma所有i/o信號(hào)使用時(shí)的值. 根據(jù)使用的i/o數(shù)量電流容量可以降低.參閱"mr-j3-na/b伺服放大器使用手冊(cè)8. 特殊的規(guī)格型號(hào):mr-j3-na/b-u004, 有單相電源200 - 240 vac供選擇 |
產(chǎn)品別名:人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)檢測(cè)試劑盒,人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
英文縮寫(xiě):SLE Elisa Kit
規(guī)格96T/48T
存儲(chǔ)條件:2-8℃ 避光儲(chǔ)存
有效期:6個(gè)月(可接受預(yù)定)
待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等。
檢測(cè)種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床
人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)elisa試劑盒等ELISA試劑盒操作技術(shù)相關(guān)的注意事項(xiàng):
⑴ 嚴(yán)格按照人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
⑵ 加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗徹底。
(3)封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴(yán),防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(4)用洗板機(jī)洗板時(shí),保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后最好在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過(guò)程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(5)合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
(6)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時(shí)保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
(9)應(yīng)保證C清潔,整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至最低限度。從而提高檢測(cè)的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理方法:
如果是新的數(shù)據(jù),你只要雙擊圖表,把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中,就可以擬和曲線。根據(jù)曲線方程式,計(jì)算出濃度。
方法:
1、擬和曲線:
輸入第一行: 濃度值, 如0 10 50 100 400
輸入第二行:該濃度下的調(diào)整后的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42
選擇這些輸入的數(shù)據(jù),用插入里的圖表按鈕,進(jìn)入圖表向?qū),?ldquo;標(biāo)準(zhǔn)類型”中選擇“xy散點(diǎn)圖”;在“子圖表類型”中選擇“折線散點(diǎn)圖”,按“下一步”;選擇“系列產(chǎn)生在行”,按“下一步”;數(shù)據(jù)標(biāo)志,可以填寫(xiě):如數(shù)據(jù)y軸,OD值;數(shù)據(jù)x軸,濃度;按下一步,點(diǎn)擊完成。可得曲線圖。
單擊曲線,按右鍵,選擇“添加趨勢(shì)線”,在類型中,選擇多項(xiàng)式;在選項(xiàng)中,選擇顯示公式,選擇顯示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面說(shuō)的方法: 雙擊圖表,把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中,就可以擬和曲線。
2、計(jì)算濃度:
第一次實(shí)驗(yàn):
標(biāo)準(zhǔn)曲線為:
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
為例,已知OD值,計(jì)算濃度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x,所以可以得到:
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0
a=4E-05;b= -0.026;
x=(-b-(b*b-4ay)(平方根)) /(2*a)
代入a,b,和y值,得
x=(0.026-(0.026*0.026-0.00016*y)(平方根))/(2*0.00004)
在excel里可以用以下公式表示:
x=(0.026-EXP(LN(0.026*0.026-0.00016*y)/2))/(2*0.00004)
人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)elisa試劑盒數(shù)據(jù)計(jì)算通用公式為:
x=(-b-EXP(LN(b*b-4ay)/2))/(2*a)
您可以應(yīng)用excel的公式拷貝功能,計(jì)算所有濃度
氣體管路系統(tǒng)
氣路系統(tǒng)是實(shí)驗(yàn)室的重要組成部分,在設(shè)計(jì)及安裝實(shí)驗(yàn)室氣路時(shí),應(yīng)根據(jù)場(chǎng)地環(huán)境及不同氣體的要求,設(shè)計(jì)選用合適的管道及氣閥,滿足實(shí)驗(yàn)室對(duì)氣體安全及潔凈度的需要。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所用氣管,必須具備防化、耐用以及不污染其氣體的條件,無(wú)油銅管及不銹鋼管是現(xiàn)時(shí)實(shí)驗(yàn)室氣路通常采用的物料之一。
1) 氣瓶間氣源切換形式
單瓶無(wú)切換形式、雙瓶手動(dòng)切換形式、雙瓶半自動(dòng)切換形式、雙瓶全自動(dòng)切換形式
2) 管路配件
鋼瓶接頭
球閥:直通卡套球閥1/4〞3/8〞1/2〞、直通內(nèi)螺紋球閥、直通外螺紋球閥、三通卡套球閥1/4〞3/8〞
針閥:直通卡套針閥1/4〞3/8〞1/2〞1/8〞、直通內(nèi)螺紋針閥、直通外螺紋針閥、
3) 管材
不銹鋼、銅、橡膠
不銹鋼:
級(jí)別:EP級(jí)、BA級(jí)、AP級(jí)、MP級(jí)
規(guī)格:1/4〞3/8〞1/2〞1/8〞3/4〞
4) 氣體減壓器
5) 氣體單向閥、安全閥、過(guò)濾器
6) VCR接頭、快速接頭
7) 卡套接頭
8) 氣體檢測(cè)報(bào)警儀
9) 氣體回火防止器
10)氣體匯流排
適用氣體:氧氣O2、燃?xì)釩3H8 C2H2 H2.非燃?xì)釧r He N2 CO2 Air高純氣體
切換形式:?jiǎn)蝹?cè)式、雙側(cè)手動(dòng)切換、雙側(cè)半自動(dòng)切換式、雙側(cè)自動(dòng)切換式
匯流排管路及材質(zhì):黃銅、不銹鋼316L
當(dāng)今,基于工業(yè)PC的現(xiàn)代控制系統(tǒng)正越來(lái)越多地被應(yīng)用于自動(dòng)化工程中。配以標(biāo)準(zhǔn)的操作系統(tǒng),諸如Windows NT,這些控制系統(tǒng)在開(kāi)放性和靈活性的軟硬件平臺(tái)方面所起的作用正日益增長(zhǎng)。在熟悉的PC世界中,用戶可謂是輕車熟路。 全PC集成的SINUMERIK 840Di數(shù)控系統(tǒng)為您提供了一個(gè)基于PC的新潮的控制概念。得益于此概念的主要用是那些以某種方式使用了PC的場(chǎng)合或者使用分布式驅(qū)動(dòng)和I/O的自控方案。應(yīng)用領(lǐng)域包括木制品,玻璃,制陶,包裝,貼片機(jī),沖壓機(jī),彎曲機(jī),以及各種機(jī)床和類似機(jī)床的機(jī)械。除了高度的軟、硬件開(kāi)放性,SINUMERIK 840Di的顯著特點(diǎn)是,CNC控制控制功能與HMI功能一起都在PC處理器上運(yùn)行。也就是說(shuō),可以省略傳統(tǒng)控制系統(tǒng)中所需的NC處理單元。這種控制系統(tǒng)包含大量的標(biāo)準(zhǔn)化部件:帶接口卡的工業(yè)PC機(jī),PROFIBUS-DP,Windows NT操作系統(tǒng),OPC(用于過(guò)程控制的OLE)用接口和NC控制軟件。
SINUMERIK 840Di可提供給您的還很多。特別有利的是其在SINUMERIK家庭中的地位。例如,SINUMERIK 840D與SINUMERIK 840Di的NC和PLC功能,操作者功能和機(jī)床數(shù)據(jù)是兼容的。相應(yīng)的NC程序和PLC程序在這兩個(gè)系統(tǒng)上都可運(yùn)行。而且由于系統(tǒng)高度開(kāi)放,軟件應(yīng)用可同樣適用于兩個(gè)系統(tǒng)。SINUMERIK 840Di是SIMATIC和SIMODRIVE自動(dòng)化控制環(huán)境的一部分。
利用PROFIBUS-DP實(shí)現(xiàn)分步式配置。如今系統(tǒng)朝著分布式方向發(fā)展的趨勢(shì)是十分明顯的。而SINUMERIK 840Di的另一個(gè)重要特點(diǎn)就是帶有位置控制的PROFIBUS-DP。這是一種用于驅(qū)動(dòng)和I/O的統(tǒng)一的現(xiàn)場(chǎng)總線。它允許速個(gè)系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)分布式配置。
SIMATIC ProTool/Pro配置工具加上附屬的"SINUMERIK ProTool/Pro選件"為您提供了特殊便利。即,用戶可利用其來(lái)生成自己專用的用戶界面而不必掌握額外的軟件工程技能。
全部功能集于同一模塊,實(shí)現(xiàn)通訊。MCI板是一塊PCI式的插板。該模塊包含了集成的SIMATIC S7 315-2 DP PLC-CPU及用于MPI多接口和PROFIBUS DP接口接和I/O。可連接SIMODRIVE611通用型驅(qū)動(dòng)裝置。SIMATIC DP ET200模塊則可作為I/O。
·CCGZ127-1集中抄表系統(tǒng)
EFM113B靜電監(jiān)測(cè)系統(tǒng) EFM113B Static Field Monitoring System |
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訂購(gòu)編號(hào): |
EFM 113B-ASP: SGG連接盒+電源控制器+UAC110轉(zhuǎn)換器+EFM113B探測(cè)頭 |
+連接線+軟件 |
EFM 113B-SGG: SGG設(shè)置器+SGG連接盒+電源控制器+UAC100轉(zhuǎn)換器 |
+EFM113B探測(cè)頭+連接線+軟件 |
品牌: 科納沃茨特(Kleinwächter) |
產(chǎn)地: 德國(guó) |
【產(chǎn)品名稱】:SYD-0728瀝青彎曲蠕變?cè)囼?yàn)系統(tǒng)
人系統(tǒng)性紅斑狼瘡elisa試劑盒 參數(shù):
編號(hào) | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F2892-B | 人系統(tǒng)性紅斑狼瘡elisa試劑盒 | Human systemic lupus erythematosus,SLE elisa Kit | 96T |
編號(hào) | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F2892-B | 人系統(tǒng)性紅斑狼瘡elisa試劑盒 | Human systemic lupus erythematosus,SLE elisa Kit | 96T |
人系統(tǒng)性紅斑狼瘡elisa試劑盒 廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中,我們來(lái)介紹一下更簡(jiǎn)便的操作說(shuō)明,編號(hào):F2892-B,英文名稱Human systemic lupus erythematosus,SLE elisa Kit
1、人系統(tǒng)性紅斑狼瘡elisa試劑盒 操作方法一用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:(1).包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。 (2).加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。 (3).加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。 (4).加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 (5).終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。 (6).結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
2、人系統(tǒng)性紅斑狼瘡elisa試劑盒 操作方法二:用于檢測(cè)未知抗體的間接法: (1).用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。 (2).加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)(3).于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。 (4).于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘 (5).于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml (6).可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。 ELISA是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果判斷較客觀等因素,以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗(yàn)又可以用于少量標(biāo)本的檢測(cè),既可以做定性試驗(yàn)也可以做定量分析等優(yōu)點(diǎn),已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)、腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域。
3、臨床標(biāo)本的收集和保存 用于ELISA測(cè)定的臨床標(biāo)本最為常用的是血清(漿),有時(shí)因?yàn)樘囟ǖ臋z測(cè)目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。目前臨床上使用血清標(biāo)本測(cè)定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物等。對(duì)用于激素和治療藥物測(cè)定的血清標(biāo)本的收集,要注意收集時(shí)間甚或體位有可能會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4~6點(diǎn)之間,會(huì)有一峰值出現(xiàn):生長(zhǎng)激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發(fā)性方式釋放,因此,在測(cè)定此類激素時(shí),有必要在密切相連的時(shí)間間隔內(nèi)采取數(shù)份血樣本,以其中間值為測(cè)定值。又如當(dāng)從臥位變?yōu)檎玖⑽粫r(shí),血清中腎素活性將出現(xiàn)明顯增高。再如治療藥物的檢測(cè),應(yīng)根據(jù)藥代動(dòng)力學(xué)選擇服藥后的最適時(shí)間抽血檢測(cè)。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物和特種蛋白等的檢測(cè)的血清標(biāo)本的收集則沒(méi)有時(shí)間和體位方面的影響,只是在處理和保存方面要考慮。
(1)要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過(guò)氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測(cè)定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長(zhǎng),其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。(3)血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存,應(yīng)在-70℃以下。(4)冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。(5)標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)。
4、試劑準(zhǔn)備 在臨床實(shí)驗(yàn)室,對(duì)試劑準(zhǔn)備一般不太注意,通常的做法是,在實(shí)驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來(lái)即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時(shí)間不夠的問(wèn)題,其直接的后果是對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性。因此在ELISA測(cè)定中試劑的準(zhǔn)備最為關(guān)鍵的是,在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20分鐘以上后,再進(jìn)行測(cè)定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達(dá)到所要求的高度,以滿足測(cè)定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實(shí)驗(yàn)室使用時(shí)對(duì)所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時(shí)所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。此外,當(dāng)試劑盒以O(shè)PD為底物時(shí),則底物溶液應(yīng)在反應(yīng)顯色前臨時(shí)配制。
在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,血清樣本的加入幾乎是唯一的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點(diǎn)是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。試劑的加入在國(guó)產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現(xiàn)重復(fù)滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會(huì)在孔內(nèi)的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附,從而引起非特異顯色。所以,有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性,下次測(cè)定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。
四、溫育溫育是ELISA測(cè)定中影響測(cè)定成敗最為關(guān)鍵的一個(gè)因素。ELISA作為一種固相免疫測(cè)定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時(shí)間。溫育所需時(shí)間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時(shí)間相對(duì)較短。最為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。溫育這一步是臨床ELISA測(cè)定中最容易出現(xiàn)問(wèn)題的步驟。通常目前國(guó)內(nèi)ELISA商品試劑盒的反應(yīng)溫育時(shí)間為37℃ 30分鐘~1小時(shí),進(jìn)口ELISA試劑盒則通常為37℃ 1~2小時(shí)才能有較完全的結(jié)合,低于1小時(shí),可能會(huì)影響測(cè)定下限。因此,關(guān)于溫育,在實(shí)際測(cè)定操作中一定要注意以下幾點(diǎn):要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時(shí)間。一般來(lái)說(shuō),加完樣本和/或反應(yīng)試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時(shí),孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃,需要一定的時(shí)間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時(shí)間可能還比較長(zhǎng),而在臨床實(shí)驗(yàn)室中,很少有人注意這個(gè)問(wèn)題,通常是將微孔板一放入溫箱即開(kāi)始計(jì)時(shí),這樣就很容易造成實(shí)際測(cè)定中溫育時(shí)間不夠,弱陽(yáng)性樣本測(cè)不出來(lái)的問(wèn)題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個(gè)問(wèn)題,就是在每一年的冬季總有那么一個(gè)多月的時(shí)間,在做HBsAg測(cè)定的室內(nèi)質(zhì)控中,測(cè)定由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心供應(yīng)的1 ng/ml弱陽(yáng)性樣本時(shí),總是測(cè)不出來(lái),不知原因?yàn)楹?這可能就與南方冬天室內(nèi)溫度較低有關(guān),此時(shí)微孔板轉(zhuǎn)入溫箱后37℃溫育時(shí)間不夠,以致弱陽(yáng)性樣本測(cè)定為陰性。因此,為保證37℃下足夠的溫育時(shí)間,臨床實(shí)驗(yàn)室可自行確定本實(shí)驗(yàn)室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長(zhǎng)時(shí)間孔內(nèi)溫度才能達(dá)到37℃,從而適當(dāng)延長(zhǎng)板條在溫箱中的放置時(shí)間。具體的做法是,用一小溫度計(jì)放置板孔反應(yīng)溶液中測(cè)量觀察即可。